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Ø PD蛋白分组系统
 
 
美国PD公司推出了一套新颖的蛋白质分组系统。该系统使用凝胶洗脱液相组分截留电泳技术),基于蛋白质分子量的不同,对完整蛋白质进行分组,使用移液器在液相中回收蛋白质。该系统能在短时间内同时处理8个样品。在3.5kDa—500kDa范围内,相对于其它传统分组方法,具有上样量大、重现性好、分辨率高、回收率高、分离速度快和操作简单的优点。能增大蛋白质组分析的覆盖范围,改善后期质谱分析的结果,提高蛋白质鉴定结果的可信度。
 
   
 
 
PD蛋白质分组系统由主机和8通道电泳槽两部分构成。主机设计紧凑,能为8个独立的电泳通道提供电压。使用触摸屏,可以设置电压、分组数和使用的通道数等参数。运行过程中,触摸屏实时显示每个通道电泳状态及电压电流值。电泳槽由五个部分组成,分别是:阴极缓冲液槽、上样槽、电泳凝胶管、样品收集槽、阳极缓冲液槽。电泳凝胶管是内装预制SDS-PAGE胶的玻璃管。缓冲液槽与上样槽及收集槽之间由一个截留分子量为3.5kDa的膜分隔开。
 
 
PD蛋白质分组系统的工作原理:
 
样品和样品缓冲液混合后加入到上样槽内。
 
电泳开始后,蛋白质首先在浓缩胶内浓缩。
 
蛋白质进入分离胶之前被浓缩成一条窄带。
 
在分离胶内,较小的蛋白质移动更快,更先从胶内进入收集槽。
 
到达预设的收集时间时,电泳暂停,从收集槽中收集第一组分的蛋白质。
 
继续电泳,重复收集操作,直至完成所有组分的收集。
 
 
 
           
选取来自不同通道的三个分组,使用一维蛋白质电泳观察分组结果的重现性。
           
对于不同的蛋白质上样量,优化好收集间隔时间,可以最大程度的提高蛋白质的回收效率。
 
PD蛋白质分组系统的特点:
 ● 能分离和收集各种蛋白质样品;

 ● 蛋白质收集方便,免去了繁琐的后续操作;

 ● 可分离分子量达500kDa的蛋白质;

 ● 8通道,每个通道可容纳1mg样品,利于分离收集到稀有蛋白质;

 ● 每个样品可分成20个以上部分;

 ● 能针对特定目标蛋白设定蛋白质收集时间;

 ● 分离效果不受蛋白质疏水性或等电点的影响;

 ● 简化蛋白质样品的组成,并不破坏样品完整性,便于蛋白质组学研究;

 ● 蛋白质收集后的后期处理更方便,避免了费时的胶内消化;
 
PD蛋白质分组系统和质谱结合时,制备蛋白质样品的操作流程
 
电泳槽: 
一次性电泳槽包含8个独立通道,可同时使用1—8个通道,处理1—8个样品,未使用的通道可保存供以后使用。针对不同的需求,提供四种凝胶盒供选择。